沙门氏菌血清学鉴定,沙门氏菌检验中的生化试验和血清学分型鉴定

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问答题，如何进行沙门氏菌的血清学鉴定？在沙门菌属的鉴定过程中，如遇生化反应符合，但与诊断血清不凝时

沙门氏菌的血清学鉴定一般先使用 A-F 多价血清进行凝集，如果 A-F 多价血清凝集，再分别尝试使用不同的抗 O 血清以确定 O 抗原，再凝集出 H 抗原的第一、第二项。

如果生化反应符合，但与诊断血清不凝时，通过生化反应实际上是可以明确目标菌是沙门氏菌的。如果不凝集，则有可能是不常见的沙门氏菌种，非常见的 A-F 群沙门氏菌，此时需要使用特殊罕见的血清才能凝集出；也可能是因为 Vi 抗原的干扰，此时可以将菌液煮沸破坏 Vi 抗原再进行血清凝集。

沙门氏菌检验中的生化试验和血清学分型鉴定

(一) 标本：肠热症随病情的进展，细菌出现的主要部位不同，因而应根据不同的病程采取不同的标本。第一周取外周血，第二周起取粪便，第三周起还可取尿液，从第一周到第三周均可去骨髓液

(二) 分离培养和鉴定

血液和骨髓液需要增菌，然后再划种于肠道选择培养基；粪便和经离心的尿沉淀物等直接接种于 SS 选择培养基或其他肠道鉴别培养基。37°C 孵育 24 小时后，挑取无色半透明的乳糖不发酵菌落接种于双糖或三糖铁培养基。若疑为沙门氏菌，再继续做生化反应，并用沙门菌多价抗血清做玻片凝集试验予以确定。

近有学者采用 SPA 协同凝集试验，对流免疫电泳，胶乳凝集试验和 ELISA 法等，来快速早期诊断粪便，血清或尿中的沙门菌等可溶性抗原。

(三) 血清学诊断：肥达试验是用已知伤寒沙门菌菌体 O 抗原和鞭毛 H 抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌, 肖氏沙门菌和希氏沙门菌鞭毛 H 抗原的诊断菌液与受检血清做试管或为空板定量凝集试验，测定受检血清中是否有相应抗体及其效价的试验。

正常值...... (先省略，有需要我可以加上去哦)

(哎，我打的手酸啊)

沙门氏菌的检验过程

因沙门氏菌是最常见的食源性细菌病原体，因此在本节中重点介绍沙门氏菌的检验。沙门氏菌是食物传播病原菌中研究最活跃的细菌。从食品中分离和鉴定沙门氏菌，当前通用的方法学分 5 个步骤：

1. 前增菌 - 第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养基中增菌，使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。

2. 选择性增菌 - 在含选择性抑制剂的促生长培养基中间，样品进一步增菌的一个步骤。此培养基允许沙门氏菌持续增殖，同时阻止大多数其他细菌的增殖。

3. 选择性平板分离 - 这一步采用固体选择性培养基，抑制非沙门氏菌的生长，提供肉眼可见的疑似沙门氏菌纯菌落的识别。

4. 生物化学筛选 - 排除大多数非沙门氏菌。也提供了沙门氏菌培养物菌属的初步鉴定。

5. 血清学技术提供了培养物菌种的鉴定。

这五个步骤代表理想状况。不过一个有经验的检验员，可能在一个或几个步骤中看出特性和差别。

目前检验食品中的沙门氏菌是按统计学取样方案为基础，25g 食品为标准分析单位。

沙门氏菌抗体检测

沙门氏菌抗体检测是一种利用抗原-抗体反应的显著特异性进行细菌鉴别和血清学定型的方法。已有超过半个世纪的历史。此方法通过检测食品载体中特定细菌的存在，建立快速检测方法。沙门氏菌免疫学检测方法种类繁多，大致可分为基于酶标抗体（ELISA）、荧光抗体染色（免疫荧光法）、同位素标记抗体（放射免疫试验）等方法，以及利用乳胶凝集、免疫传感器、免疫扩散及免疫色谱技术等以抗体为基础的方法。其中，以双位点 ELISA 技术为基础的方法是最为常见且广泛采用的常规方法。

改进后的技术使用放射活性同位素替代标记抗体，通过固定在固体基质上的“捕捉”抗体捕捉目标抗原，加入酶标抗体结合，进行酶作用基质与颜色成分反应后，通过分光光度法检测目标抗原。

黎兆滚等人在国内口岸系统首次应用微量板 ELISA 法（Salmonelletest1）对进出口动物产品进行沙门氏菌检测。此方法采用预先包被了沙门氏菌（A-E 群）单克隆抗体的微量板，加入经增菌处理的样品，反应后再加入指示剂，通过酶标仪测定 OD 值判定结果。食物样品经适当的增菌处理后，亦可使用此方法进行沙门氏菌检测。ELISA 法检出沙门氏菌的极限范围为 105～106 个细胞/ml，因此，要得出可靠的结果，食物样品需首先进行预增菌、选择性增菌，通常在含有 D-甘露糖的肉汤（M 肉汤）中进行后增菌，以促进鞭毛发育。标准的 ELISA 法样品制备过程约需要 40～48h，而黎兆滚等人的微量板 ELISA 法（Salmonellatest1) 则在 24h 内完成样品制备过程，大幅缩短了时间。

最新式的沙门氏菌免疫学检测法利用经特异性抗体敏化的免疫色谱卡片为基础。此方法通过几滴样品加到卡片上，结果可以直接用肉眼读出。免疫色谱卡片易于操作，且由于无需特殊设备，适合小型实验室使用。虽然卡片检测法与 ELISA 法一样需要对样品进行增菌处理，但它（卡片法）本身的操作时间通常不超过 10min，采用黎兆滚等人的样品制备法，操作时间进一步缩短。

扩展资料

1885 年沙门氏等在霍乱流行时分离到猪霍乱沙门氏菌，故定名为沙门氏菌属。沙门氏菌属有的专对人类致病，有的只对动物致病，也有对人和动物都致病。沙门氏菌病是指由各种类型沙门氏菌所引起的对人类、家畜以及野生禽兽不同形式的总称。感染沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染食品，可使人发生食物中毒。据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中，沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。我国内陆地区也以沙门氏菌为首位。